avatar avatar 我的文献 应用循环肿瘤细胞解析胰腺癌上皮—间质转化全程及其临床意义探究 作者 朱融融 单位 北京协和医学院 导师 赵玉沛; 戴梦华 关键词 胰腺癌; 上皮-间质转化; 循环肿瘤细胞; 侵袭转移; 液体活检
摘要
[背景]胰腺癌早期即具有极强的侵袭转移能力,导致临床上确诊胰腺癌的患者手术可切除率低,临床预后极差。上皮-间质转化(Epithelial-Mesenchymal Transition, EMT)被认为是肿瘤的侵袭转移的关键机制之一,但通常只能对原位肿瘤及转移灶进行研究,无法对肿瘤细胞血行转移过程中的EMT进行观察,因此少有针对胰腺癌EMT全程的研究。而循环肿瘤细胞(Circulating tumor cell, CTC)除可作为“液体活检”之外,因其产生与EMT直接相关也被认为是研究循环血中EMT的重要工具,使得针对胰腺癌原位肿瘤-外周血肿瘤细胞-转移灶的EMT全程研究成为可能。[目的]1.评估胰腺癌CTC作为“液体活检”的临床应用前景。2.通过比较胰腺癌原位肿瘤、外周血CTC和转移淋巴结中上皮和间质标志物的表达对胰腺癌EMT的全程进行解析。[方法]1.采用SET-iFISH法对胰腺癌患者外周血CTC进行分类计数及动态监测,分析不同分类计数与手术、化疗、复发转移、临床病理及预后的相关性。2.采用芯片法对胰腺癌患者外周血CTC进行上皮标志物E-cadherin和间质标志物Vimentin的染色,分析不同EMT分类情况与手术、化疗、临床病理的相关性。3.应用免疫组化对确诊胰腺导管腺癌患者的原位肿瘤及转移淋巴结中上皮标志物E-cadherin和间质标志物Vimentin进行染色及评分,分析EMT水平与临床病理及预后的相关性;并通过与芯片法中CTC染色情况比较对胰腺癌EMT全程进行解析。[结果]1. SET-iFISH法:研究共对27名研究对象(20名胰腺导管腺癌患者、5名胰腺良性占位及2名健康受试者)的63例血标本进行检测。CTC分类计数与手术、化疗、临床病理特征呈现一定变化趋势,而术前检测到CTM的患者具有更短的OS(P=0.027)和PFS(p=0.015)。在原位肿瘤及胰腺癌腹水转移细胞中以上皮型细胞为主,而外周血CTC中绝大多数为非上皮型细胞。2.芯片法:研究共对24名研究对象(22名胰腺导管腺癌患者及2名健康受试者)的46例血标本进行检测,并对CTC中EMT情况(E、E>M、E=M、E<M和M型)进行分类计数。手术可导致CTC总数(p=0.005)及M型CTC(p=0.000)计数下降,而化疗则导致E型CTC (p=0.004)计数下降,进而导致间质为主型CTC比例则呈上升趋势。CTC总数与临床分期、T分期及远处转移相关(p<0.05),但CTC中上皮和间质比例与侵袭转移等临床病理特征间相关性不具有统计学意义。3.研究共纳入27名确诊胰腺导管腺癌的患者,其癌组织中E-cadherin的IHC评分与分化程度(p=0.016)呈正相关,而Vimentin与分化程度负相关(p=0.016)。E>M组和E<M组平均无病生存期分别为627.5�49.0天和337.1�80.9天,差异具有统计学意义(χ2=4.867,p=0.027)。胰腺癌癌组织中E-cadherin表达下降而Vimentin表达升高。胰腺癌原位肿瘤及转移淋巴结中以E-cadherin表达为主,而外周血CTC上上皮及间质比例约各占50%。[结论]1.液体活检:CTM与胰腺癌不良预后密切相关;胰腺癌CTC分类计数与临床分期、T分期及远处转移相关,并随手术、化疗、复发转移成一定变化趋势。2.胰腺癌EMT全程:胰腺癌原位肿瘤-外周血CTC-转移淋巴结呈现EMT/MET变化趋势,EMT与化疗及不良预后相关,但其与侵袭转移的关系仍需进一步研究。
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